Febre amarela silvestre: reemergencia de transmissao no estado de Sao Paulo, Brasil, 2009 / Fiebre amarilla silvestre: re emergencia de transmision en el estado de Sao Paulo, Brasil, 2009 / Yellow fever: reemerging in the state of Sao Paulo, Brazil, 2009

OBJETIVO Descrever a investigação do surto de febre amarela silvestre e as principais medidas de controle realizadas no estado de São Paulo. MÉTODOS Estudo descritivo do surto de febre amarela silvestre na região sudoeste do estado, entre fevereiro e abril de 2009. Foram avaliados casos suspeitos e confirmados em humanos e primatas não humanos. A investigação entomológica, em ambiente silvestre, envolveu captura em solo e copa de árvore para identificação das espécies e detecção de infecção natural. Foram realizadas ações de controle de Aedes aegypti em áreas urbanas. A vacinação foi direcionada para residentes dos municípios com confirmação de circulação viral e nos municípios contíguos, conforme recomendação nacional. RESULTADOS Foram confirmados 28 casos humanos (letalidade 39,3%) em áreas rurais de Sarutaiá, Piraju, Tejupá, Avaré e Buri. Foram notificadas 56 mortes de primatas não humanos, 91,4% do gênero Alouatta sp . A epizootia foi confirmada laboratorialmente em dois primatas não humanos, sendo um em Buri e outro em Itapetininga. Foram coletados 1.782 mosquitos, entre eles Haemagogus leucocelaenus , Hg. janthinomys/capricornii , Sabethes chloropterus , Sa. purpureus e Sa. undosus . O vírus da febre amarela foi isolado de um lote de Hg. leucocelaenus procedente de Buri. A vacinação foi realizada em 49 municípios, com 1.018.705 doses aplicadas e o registro de nove eventos adversos graves pós-vacinação. CONCLUSÕES Os casos humanos ocorreram entre fevereiro e abril de 2009 em áreas sem registro de circulação do vírus da febre amarela há mais de 60 anos. A região encontrava-se fora da área com recomendação de vacinação, com alto percentual da p...

OBJETIVO Describir la investigación de brote de fiebre amarilla silvestre y las principales medidas de control realizadas en el estado de Sao Paulo. MÉTODOS Estudio descriptivo del brote de fiebre amarilla silvestre en la región suroeste del Estado, entre febrero y abril de 2009. Se evaluaron casos sospechosos y confirmados en humanos y primates no humanos. La investigación entomológica, en ambiente silvestre, involucró capturo en suelo y copa de árboles para identificación de las especies y detección de infección natural. Se realizaron acciones de control de Aedes aegypti en áreas urbanas. La vacunación fue direccionada a residentes de los municipios con confirmación de circulación viral y en los municipios contiguos, siguiendo recomendación nacional. RESULTADOS Se confirmaron 28 casos en humanos (letalidad 39,3%) en áreas rurales de Sarutaiá, Pirajú, Tejupá, Avaré y Buri. Se notificaron 56 muertes de primates no humanos, 91,4% del género Allouatta sp. La epizootia fue confirmada laboratorialmente en dos primates no humanos siendo uno de Buri y el otro de Itapetininga. Se colectaron 1.782 mosquitos, entre ellos Haemagogus leucocelaenus, Hg. janthinomys/capricornii, y Sabethes chloropterus, Sa. purpureus y Sa. undosus. El virus de la fiebre amarilla fue aislado de un lote de Hg. leucocelaenus procedente de Buri. La vacunación fue realizada en 49 municipios, con 1.018.705 dosis aplicadas y el registro de nueve eventos adversos graves post-vacunación. CONCLUSIONES Los casos humanos ocurrieron entre febrero a abril de 2009 en áreas sin registro de circulación del virus de la fiebre amarilla por más de 60 años. La región se encontraba fuera del área de recomendación de vacunación, con alto porcentaje de población susceptible. La adopción oportuna de medidas de control permitió ...

OBJECTIVE To describe the investigation of a sylvatic yellow fever outbreak in the state of Sao Paulo and the main control measures undertaken. METHODS This is a descriptive study of a sylvatic yellow fever outbreak in the Southwestern region of the state from February to April 2009. Suspected and confirmed cases in humans and in non-human primates were evaluated. Entomological investigation in sylvatic environment involved capture at ground level and in the tree canopy to identify species and detect natural infections. Control measures were performed in urban areas to control Aedes aegypti . Vaccination was directed at residents living in areas with confirmed viral circulation and also at nearby cities according to national recommendation. RESULTS Twenty-eight human cases were confirmed (39.3% case fatality rate) in rural areas of Sarutaiá, Piraju, Tejupá, Avaré and Buri. The deaths of 56 non-human primates were also reported, 91.4% were Allouatta sp. Epizootics was confirmed in two non-human primates in the cities of Itapetininga and Buri. A total of 1,782 mosquitoes were collected, including Haemagogus leucocelaenus , Hg. janthinomys/capricornii , and Sabethes chloropterus, Sa. purpureus and Sa. undosus . Yellow fever virus was isolated from a group of Hg. Leucocelaenus from Buri. Vaccination was carried out in 49 cities, with a total of 1,018,705 doses. Nine serious post-vaccination adverse events were reported. CONCLUSIONS The cases occurred between February and April 2009 in areas with no recorded yellow fever virus circulation in over 60 years. The outbreak region occurred outside the original recommended vaccination area with a high percentage of susceptible population. The fast adoption of control measures interrupted the human transmission within a month and the confirmation of viral circulation in humans, monkeys and mosquitoes. The results allowed the identification of new areas of viral circulation but ...

Serological survey of hantavirus in rodents in Uberlândia, Minas Gerais, Brazil / Inquérito sorológico de hantavírus em roedores, Uberlândia, Minas Gerais, Brasil

We conducted a serological survey to determine the presence of hantavirus infection in rodents in Uberlândia, Minas Gerais as well as to identify and characterize associated factors. Rodents were captured using Sherman live-capture traps set in rural and peri-urban environments. A total of 611 rodents were captured. There was a higher trap success in peri-urban areas (26.3%) and a higher prevalence of antibodies among rodents captured in rural areas (2.9%). Necromys lasiurus was the most common species (42.2%) and the more frequently infected (4.6%). One Calomys tener (1/141; 0.7%) and one Calomys sp. (1/14; 7.1%) were also positive for the hantavirus infection. In N. lasiurus, antibody prevalence correlated with population density (p < 0.01), age class (p = 0.003) and presence of scars (p = 0.02). The data confirm that horizontal transmission is the main mechanism that maintains the virus in nature. The higher seropositivity in N. lasiurus is consistent with genetic studies that associate this species with an Araraquara virus reservoir; the seropositivity of C. tener and Calomys sp. may indicate the occurrence of spillover infection or the presence of other circulating hantaviruses.

Realizamos um estudo transversal para identificar a presença de infecção por hantavírus em roedores em Uberlândia, Minas Gerais, e também para identificar e caracterizar fatores associados. Roedores foram capturados usando armadilhas do tipo Sherman em ambientes rural e periurbano. Um total de 611 roedores foi capturado. Houve maior sucesso de captura na área periurbana (26,3%) e maior prevalência de anticorpos entre os roedores capturados na área rural (2,9%). Necromys lasiurus foi a espécie mais encontrada (42,2%) e a mais frequentemente infectada (4,6%). Um Calomys tener (1/141; 0.7%) e um Calomys sp. (1/14; 7.1%) foram também positivos. Os dados obtidos mostram que em N. lasiurus, a prevalência de anticorpos está relacionada à densidade populacional (p < 0.01), a classe de idade (p = 0.003) e a presença de cicatrizes (p = 0.02), confirmando que a transmissão horizontal é o principal mecanismo que mantém o vírus na natureza. A maior positividade em N. lasiurus é consistente com estudos genéticos que permitem associar esta espécie como reservatório do vírus Araraquara; a soropositividade de C. tener e Calomys sp. pode indicar a ocorrência de "spillover infection" ou a presença de outros hantavírus circulantes.

Yellow fever epizootics in non-human primates, São Paulo state, Brazil, 2008-2009 / Epizootias de febre amarela em primatas não humanos no estado de São Paulo, Brasil, 2008-2009

Since 2000, the expansion of Sylvatic Yellow Fever (YF) has been observed in the southeast of Brazil, being detected in areas considered silent for decades. Epizootics in non-human primates (NHPs) are considered sentinel events for the detection of human cases. It is important to report epizootic events that could have impact on the conservation status of susceptible species. We describe the epizootics in NHPs, notified in state of São Paulo, Brazil, between September 2008 to August 2009. Ninety-one epizootic events, involving 147 animals, were reported in 36 counties. Samples were obtained from 65 animals (44.2%). Most of the epizootics (46.6%) were reported between March and April, the same period during which human cases of YF occurred in the state. Biological samples were collected from animals found dead and were sent to Instituto Adolfo Lutz, in São Paulo. Two samples, collected in two counties without an indication for YF vaccination, were positive for the virus. Another 48 animals were associated with YF by clinical-epidemiological linkage with laboratory confirmed cases. Because the disease in human and NHPs occurred in the same period, the detection of the virus in NHPs did not work as sentinel, but aided in the delineation of new areas of risk.

Desde 2000, vem sendo observada a expansão da febre amarela (FA) no Sudeste do Brasil, sendo detectados casos em áreas consideradas silenciosas por décadas. Epizootias em primatas não humanos (NHPs) são considerados eventos sentinela para a detecção de casos humanos. É importante relatar eventos epizoóticos que podem ter impacto sobre o estado de conservação de espécies sensíveis. Descrevemos as epizootias, notificadas em NHPs no estado de São Paulo, Brasil, entre setembro de 2008 a agosto de 2009. Noventa e um eventos epizoóticos, envolvendo 147 animais, foram notificados em 36 municípios. As amostras foram obtidas a partir de 65 animais (44,2%). A maioria das epizootias (46,6%) foram registradas entre março e abril, no mesmo período no qual YF em que casos humanos ocorreram no estado. As amostras biológicas foram coletadas de animais encontrados mortos e enviadas ao Instituto Adolfo Lutz, em São Paulo. Duas amostras, coletadas em dois municípios, sem indicação para a vacinação de febre amarela, foram positivos para o vírus. Outros 48 animais foram associados com FA por vínculo clínico-epidemiológico com casos confirmados laboratorialmente. Devido a doença em humanos e NHPs terem ocorrido no mesmo período, a detecção do vírus em NHPs não funcionou como sentinela, mas ajudou no processo de delimitação de novas áreas de risco.

Indução de Diabetes Tipo 2 por dieta hiperlipídica e baixa dose de estreptozotocina em ratas wistar / Induction of Type 2 Diabetes by low dose of streptozotocin and high-fat diet-fed in wistar rats

O objetivo do presente estudo experimental foi desenvolver um modelo animal de diabetes tipo 2 que mimetizasse o curso natural e metabólico desta doença em humanos. Assim, foi oferecida uma dieta hiperlipídica (com aproximadamente 60% das calorias totais provenientes de lipídeos) por três semanas, estabelecendo então, um quadro de resistência à insulina. Em seguida, as ratas foram submetidas a uma dose única de estreptozotocina (STZ) (35mg/kg de peso corporal) em veículo de tampão citrato (pH: 4,4). Após 1 semana da injeção de STZ, as ratas foram submetidas ao teste oral de tolerância à glicose, mediante administração oral de glicose (2g glicose/kg de massa corporal). Os dados foram submetidos à comparação entre os grupos utilizando-se o teste t. A significância em todos os testes se deu ao nível de p ≤ 0,05. O grupo controle manteve a concentração média de glicose final igual a inicial. Após ingestão da dieta hiperlipídica houve um aumento da glicemia de jejum em cerca de 16,5% em relação ao momento inicial do experimento (P<0,0001) enquanto os animais que receberam a dieta controle apresentaram um aumento aproximado de 8,7%. Uma semana após a administração intraperitoneal de STZ, pode-se verificar aumento da concentração média de glicose no grupo hiperlipídico em cerca de 194,2%, representando um aumento de 275,8% (P<0,0001) quando comparado ao GC. O presente estudo retrata que a combinação de uma dieta hiperlipídica e baixa dose de estreptozotocina serve como um modelo animal alternativo para a diabetes tipo 2 simulando a síndrome em humanos

The objective of the present experimental study is to develop an animal model of type 2 diabetes which mimics the natural and metabolic course of this disease in humans. Therefore, a high-fat diet (with approximately 60% of the calories from lipidis) was offered for 3 weeks, establishing an insulin resistant picture. After, the female rats were submitted to a single dose of streptozotocin (STZ) (35mg/kg of bodymass) using citrate buffer (pH:4,4). After a week of the injection of STZ, the female rats were submitted to the glucose tolerance oral test, by oral administration of glucose (2g glucose/ kg of body mass). The data was compared between groups using the test t. The significance in all tests was on level of p<0,05. The control group kept the final average glucose concentration equals to the initial. After the ingestion of the high-fat diet an increase of 16,5% of the fasting glucose happened compared to the initial moment of the experiment (P<0,0001) while the animals that received the control diet presented an increase of approximately 8,7%. One week after the intraperitoneal administration of STZ, the high-fat feed group showed anincrease of about 194,2% of the average concentration of glucose, representing an increase of about 275,8% (P<0,0001) when compared to the control group. The present study shows that the combinationof a high-fat diet and low dose of streptozotocin works as an alternative animal model for type 2 diabetes simulating the disease in humans.

First isolation of dengue 4 in the state of São Paulo, Brazil, 2011 / Primeiro isolamento de Dengue 4 no Estado de São Paulo, Brasil, 2011

We report the first isolation of Dengue virus 4 (DENV-4) in the state of São Paulo, from two patients - one living in São José do Rio Preto and the other one in Paulo de Faria, both cities located in the Northwest region of the state. The virus isolations were accomplished in the clone C6/36 Aedes albopictus cell line, followed by indirect immunofluorescence assays, performed with type-specific monoclonal antibodies that showed positive reactions for DENV-4. The results were confirmed by Nested RT-PCR and Real-Time RT-PCR assays. The introduction of DENV-4 in a country that already has to deal with the transmission of three other serotypes increases the possibility of the occurrence of more severe cases of the disease. The importance of early detection of dengue cases, before the virus spreads and major outbreaks occur, should be emphasized.

Relatamos o primeiro isolamento do vírus Dengue 4 (DENV-4) no Estado de São Paulo, de dois pacientes residentes em São José do Rio Preto e Paulo de Faria, ambos municípios localizados na região Noroeste do Estado. O isolamento do vírus foi realizado em clone C6/36, linhagem de células de Aedes albopictus seguido por imunofluorescência indireta, realizada com anticorpos monoclonais tipo específicos, que apresentou reação positiva para DENV-4. Os resultados foram confirmados por testes de Nested RT-PCR e RT-PCR em Tempo Real. A introdução do DENV-4 no país, com uma população suscetível a esse vírus e que já convive com a transmissão de outros três sorotipos, aumenta a possibilidade da ocorrência de casos mais graves da doença. Deve ser enfatizada a importância da detecção precoce de casos de dengue, antes que ocorra a propagação do vírus e que surtos importantes aconteçam.

Efeito da semente de linhaça no crematócrito do leite de ratas e sua contribuição no crescimento corporal dos filhotes / Effects of flaxseed on rat milk creamatocrit and its contribution to offspring body growth

OBJETIVOS: Avaliar o efeito da semente de linhaça no crematócrito do leite de ratas e crescimento corporal dos filhotes durante a lactação. MÉTODOS: Utilizou-se 22 ratas Lister Hooded divididas em dois grupos: controle (GC, n = 11), que recebeu ração caseína com 17 por cento de proteína; e linhaça (GL, n = 11), que recebeu ração com 25 por cento de linhaça acrescida de 14 por cento de caseína, totalizando 17 por cento de proteína. Controlou-se o consumo de ração das ratas por gaiola individual, número de crias, e avaliou-se o crematócrito do leite materno e variação ponderal dos filhotes até idade de desmame. RESULTADOS: O GL foi semelhante ao GC no consumo de ração das ratas (GL = 76,46±31,87 g; GC = 76,7±33,36 g; p = 0,9613) e equivalente ao GC no número de crias (GL = 4,94±2,34; GC = 5,5±3,19; p = 0,435). O mesmo foi verificado no teor de gordura do leite materno (GL = 18,4±4,76; GC = 15,3±6,03; p = 0,204) e valor energético total (GL = 212,92±46,4; GC = 181,1±60; p = 0,1964). O GL assemelhou-se ao GC tanto no peso corporal dos filhotes ao desmame (GL = 37±6,96 g; GC = 32,6±7,5 g; p = 0,1817) quanto na evolução ponderal (GL = 31,8±7,0 g; GC = 27,7±7,5 g; p = 0,2104). CONCLUSÃO: Um total de 25 por cento de linhaça promoveu um crescimento adequado aos filhotes.

OBJECTIVES: To assess the effect of flaxseed on rat milk creamatocrit and its contribution to offspring weight gain during lactation. METHODS: The study was conducted with 22 Lister Hooded rats divided into two groups: Control Group (CG, n = 11), which received a casein-based diet with 17 percent protein, and Flaxseed Group (FG, n = 11), which received a 25 percent flaxseed diet supplemented with 14 percent casein, totaling 17 percent protein. Food consumption was controlled per individual cage and litter size. Maternal milk creamatocrit and offspring weight variation until weaning age were also evaluated. RESULTS: FG was similar to CG concerning food intake (FG = 76.46±31.87 g; CG = 76.7±33.36 g; p = 0.9613) and equivalent to CG concerning litter size (FG = 4.94±2.34; CG = 5.5±3.19; p = 0.435). The same was found for milk fat content (FG = 18.4±4.76; CG = 15.3±6.03; p = 0.204) and total energy value (FG = 212.92±46.4; CG = 181.1±60; p = 0.1964). FG was similar to CG both in offspring body weight at weaning (FG = 37±6.96 g; CG = 32.6±7.5 g; p = 0.1817) and in weight gain (FG = 31.8±7.0 g; CG = 27.7±7.5 g; p = 0.2104). CONCLUSION: A total of 25 percent flaxseed promoted an adequate offspring growth.

Evaluation of dengue NS1 antigen detection for diagnosis in public health laboratories, São Paulo State, 2009 / Avaliação da detecção do antígeno NS1 para diagnóstico de dengue nos Laboratórios de Saúde Pública, Estado de São Paulo, 2009

The present work evaluated the diagnostic accuracy of detection of Dengue NS1 antigen employing two NS1 assays, an immunochromatographic assay and ELISA, in the diagnostic routine of Public Health laboratories. The results obtained with NS1 assay were compared with virus isolation and, in a subpopulation of cases, they were compared with the IgM-ELISA results obtained with convalescent samples. A total of 2,321 sera samples were analyzed by one of two NS1 techniques from March to October 2009. The samples were divided into five groups: groups I, II and III included samples tested by NS1 and virus isolation, and groups IV and V included patients with a first sample tested by NS1 and a second sample tested by IgM-ELISA. Sensitivity, specificity, positive and negative predictive values, Kappa Index and Kappa Concordance were calculated. The results showed that NS1 testing in groups I, II and III had high sensitivity (98.0 percent, 99.5 percent and 99.3 percent), and predictive values and Kappa index between 0.9 - 1.0. Groups IV and V only had Kappa Concordance calculated, since the samples were analyzed according to the presence of NS1 antigen or IgM antibody. Concordance of 92.1 percent was observed when comparing the results of NS1-negative samples with IgM-ELISA. Based on the findings, it is possible to suggest that the tests for NS1 detection may be important tools for monitoring the introduction and spread of Dengue serotypes.

Esse estudo avaliou a acurácia do diagnóstico por detecção do antígeno NS1 do vírus Dengue empregando-se ensaios em dois formatos, imunocromatográfico e ELISA, na rotina diagnóstica dos laboratórios de Saúde Pública. Compararam-se os resultados de NS1 com os resultados de isolamento viral e, em parte dos casos, foi feita a comparação com os resultados de IgM-ELISA, obtidos nas segundas amostras. Um total de 2.321 amostras de soros, obtidas no período de março a outubro de 2009, foram analisadas por uma das duas técnicas NS1. As amostras foram divididas em cinco grupos: I, II e III, que incluíram amostras analisadas por testes NS1 e por isolamento de vírus. Os grupos IV e V incluíram pacientes com a primeira amostra processada por NS1 e segunda por IgM-ELISA. Foram analisadas sensibilidade, especificidade, valor preditivo positivo e negativo, concordância e índice Kappa. Os resultados mostraram que os grupos I, II e III apresentaram alta sensibilidade (98,0 por cento, 99,5 por cento e 99,3 por cento), valores preditivos e índice Kappa entre 0,9 - 1,0. Nos grupos IV e V, apenas concordância foi calculada, dado que as amostras foram analisadas quanto à presença de antígeno NS1 ou de anticorpos IgM. Comparando-se os resultados negativos de NS1 com IgM-ELISA houve 92,1 por cento de concordância. Com base nas constatações feitas, é possível sugerir que a detecção de NS1 pode ser importante ferramenta para monitorar a introdução e disseminação dos sorotipos de Dengue.

Isolation of yellow fever virus (YFV) from naturally infectied Haemagogus (Conopostegus) leucocelaenus (diptera, cukicudae) in São Paulo State, Brazil, 2009 / Isolamento do vírus da Febre Amarela de mosquitos naturalmente infectados Haemagogus (Conopostegus) leucocelaenus (Diptera, Culicidae), São Paulo, Brasil, 2009

After detecting the death of Howlers monkeys (genus Alouatta) and isolation of yellow fever virus (YFV) in Buri county, São Paulo, Brazil, an entomological research study in the field was started. A YFV strain was isolated from newborn Swiss mice and cultured cells of Aedes albopictus - C6/36, from a pool of six Haemagogus (Conopostegus) leucocelaenus (Hg. leucocelaenus) mosquitoes (Dyar & Shannon) collected at the study site. Virus RNA fragment was amplified by RT-PCR and sequenced. The MCC Tree generated showed that the isolated strain is related to the South American I genotype, in a monophyletic clade containing isolates from recent 2008-2010 epidemics and epizootics in Brazil. Statistical analysis commonly used were calculated to characterize the sample in relation to diversity and dominance and indicated a pattern of dominance of one or a few species. Hg. leucocelaenus was found infected in Rio Grande do Sul State as well. In São Paulo State, this is the first detection of YFV in Hg. leucocelaenus.

Após a detecção de morte de macacos Bugios (gênero Alouatta) e isolamento do vírus da Febre Amarela (YFV) no município de Buri, Estado de São Paulo, Brasil, foi iniciada uma investigação entomológica em campo. Uma cepa de YFV foi isolada em camundongos recém-nascidos e cultura de células de Aedes albopictus - C6/36, a partir de um lote de seis mosquitos Haemagogus (Conopostegus) leucocelaenus (Hg leucocelaenus) Dyar & Shannon coletados no local de estudo. RNA do vírus foi amplificado por RT-PCR e seqüenciado. A topologia gerada indica que a cepa isolada está relacionada ao genótipo South American I, em clado monofilético englobando isolados recentes de epidemias e epizootias entre 2008 e 2009. Análises estatísticas geralmente usadas caracterizaram a amostra em relação à diversidade e dominância, indicando dominância relativa de uma ou poucas espécies. Hg. leucocelaenus foi detectado infectado também no Rio Grande do Sul. No Estado de São Paulo trata-se da primeira detecção do YFV em Hg leucocelaenus.

Reemergence of yellow fever: detection of transmission in the State of São Paulo, Brazil, 2008 / Reemergência de febre amarela: detecção de transmissão no Estado de São Paulo, Brasil, 2008

INTRODUCTION: Following yellow fever virus (YFV) isolation in monkeys from the São José do Rio Preto region and two fatal human autochthonous cases from the Ribeirão Preto region, State of São Paulo, Brazil, two expeditions for entomological research and eco-epidemiological evaluation were conducted. METHODS: A total of 577 samples from humans, 108 from monkeys and 3,049 mosquitoes were analyzed by one or more methods: virus isolation, ELISA-IgM, RT-PCR, histopathology and immunohistochemical. RESULTS: Of the 577 human samples, 531 were tested by ELISA-IgM, with 3 positives, and 235 were inoculated into mice and 199 in cell culture, resulting in one virus isolation. One sample was positive by histopathology and immunohistochemical. Using RT-PCR, 25 samples were processed with 4 positive reactions. A total of 108 specimens of monkeys were examined, 108 were inoculated into mice and 45 in cell culture. Four virus strains were isolated from Alouattacaraya. A total of 931 mosquitoes were captured in Sao Jose do Rio Preto and 2,118 in Ribeirão Preto and separated into batches. A single isolation of YFV was derived from a batch of 9 mosquitoes Psorophoraferox, collected in Urupês, Ribeirão Preto region. A serological survey was conducted with 128 samples from the municipalities of São Carlos, Rincão and Ribeirão Preto and 10 samples from contacts of patients from Ribeirão Preto. All samples were negative by ELISA-IgM for YFV. CONCLUSIONS: The results confirm the circulation of yellow fever, even though sporadic, in the Sao Paulo State and reinforce the importance of vaccination against yellow fever in areas considered at risk.

INTRODUÇÃO: A partir do isolamento do vírus febre amarela (VFA), de macacos, da região de São José do Rio Preto e de dois casos humanos autóctones fatais, da região de Ribeirão Preto, Estado de São Paulo, foram realizadas duas expedições para pesquisa entomológica e avaliação ecoepidemiológica. MÉTODOS: Um total de 577 amostras de humanos, 108 de macacos e 3.049 mosquitos foram analisados por um ou mais métodos: isolamento viral, ELISA-IgM, RT-PCR, histopatologia e imunohistoquímica. RESULTADOS: De 577 amostras humanas, 531 foram testadas por ELISA-IgM, sendo 3 positivas, 235 foram inoculadas em camundongos, 199 em cultura de células, obtendo-se 1 isolamento viral. Uma amostra foi positiva por histopatologia e imunohistoquímica. Por RT-PCR foram processadas 25 amostras com 4 reações positivas. Os 108 espécimes de macacos foram inoculados em camundongos, 45 em cultura de células, obtendo-se 4 isolamentos de VFA, de Alouatta caraya. Um total de 931 mosquitos foram capturados em São José do Rio Preto e 2.118 em Ribeirão Preto e separados em lotes. Um único isolamento de VFA foi derivado de um lote de 9 mosquitos Psorophora ferox, coletados em Urupês, região de Ribeirão Preto. Um inquérito sorológico foi realizado com 128 amostras dos municípios de São Carlos, Rincão e Ribeirão Preto e mais 10 amostras de contactantes de pacientes de Ribeirão Preto. Todas as amostras foram negativas por ELISA-IgM para VFA. CONCLUSÕES: Os resultados confirmam a circulação, mesmo que esporádica, do VFA no Estado de São Paulo e reforça a importância da vacinação antiamarílica nas áreas consideradas de risco.

Mayaro virus: imported cases of human infection in São Paulo State, Brazil

Mayaro virus (MAYV) is an arbovirus (Togaviridae: Alphavirus) enzootic in tropical South America and maintained in a sylvan cycle involving wild vertebrates and Haemagogus mosquitoes. MAYV cases occur sporadically in persons with a history of recent activities inside or around forests. This paper reports three cases of MAYV fever detected in men infected in Camapuã, MS, Brazil. Serum samples collected at four days and two months after the onset of the symptoms and examined by hemagglutination inhibition test, revealed monotypic seroconversion to MAYV. Isolation of the virus was obtained from one of the samples by inoculation of the first blood samples into newborn mice. A suspension of the infected mouse brain was inoculated into C6/36 cells culture and the virus was identified by indirect immunofluorescent assay with alphavirus polyclonal antibodies. RT-PCR, performed with RNA extracted from the supernatant of C6/36 infected cells in the presence of alphavirus generic primers as well as specific MAYV primers, confirmed these results. The reported cases illustrate the importance of laboratory confirmation in establishing a correct diagnosis. Clinical symptoms are not always indicative of a disease caused by an arbovirus. Also MAYV causes febrile illness, which may be mistaken for dengue.

O vírus Mayaro (MAYV) é um arbovírus do gênero Alphavirus, família Togaviridae, enzoótico na América do Sul, sendo mantido em ciclo silvestre envolvendo vertebrados e mosquitos Haemagogus. Casos de MAYV são esporádicos e ocorrem em pessoas com história de recentes atividades dentro ou próximo a florestas. Este artigo relata infecção por MAYV detectada em três pacientes, infectados em Camapuã, MS, Brasil. Amostras de sangue, coletadas no 4° dia e no 2° mês após o início dos sintomas, foram usadas para teste de inibição da hemaglutinação, que revelou soroconversão monotípica para MAYV. O isolamento do vírus foi obtido somente de uma das amostras, por inoculação em camundongos lactentes. Suspensão de cérebro de camundongo infectado foi inoculada em cultura de células C6/36 e o vírus foi identificado por imunofluorescência indireta com anticorpos policlonais para alphavirus. RT-PCR realizado com RNA extraído do sobrenadante de células C6/36 infectadas, na presença de "primers" genéricos para alphavirus assim como "primers" para MAYV, confirmou os resultados. Os casos relatados ilustram a importância da confirmação laboratorial em estabelecer um diagnóstico correto. Os sintomas clínicos não são sempre indicativos de uma doença causada por arbovírus. MAYV causa doença febril, que pode ser confundida com dengue.

St. Louis encephalitis vírus: first isolation from a human in São Paulo state, Brasil

O presente estudo relata o isolamento do vírus da encefalite São Luis (SLEV) de um caso febril humano suspeito de dengue, em São Pedro, Estado de São Paulo. MAC-ELISA realizado com soros das fases aguda e convalescente foi inconclusivo e anticorpos IgG foram detectados por inibição da hemaglutinação para flavivirus. Imunofluorescência indireta com cultura de células C6/36 inoculadas com soro da fase aguda foi positivo para flavivirus mas negativo quando testado com anticorpos monoclonais para dengue. O RNA extraído de cultura de células infectadas foi amplificado na presença de primers universais para o gênero Flavivirus, deduzidos de uma região da proteína não estrutural 5 e diretamente sequenciado. Os resultados da pesquisa no BLAST indicaram que a seqüência apresenta 93% de similaridade de nucleotídeos com a seqüência de SLEV (cepa MS1.7), confirmado por RT-PCR, realizado com primers específicos para SLEV. O fato de SLEV ter sido identificado como a causa de doença humana indica a necessidade de aprimorar a vigilância a fim de detectar precocemente esse agente no Estado de São Paulo e no Brasil. Esse caso é também um alerta para os profissionais de saúde sobre a necessidade de investigações clínicas e epidemiológicas mais completas sobre doenças febris como no caso relatado. Infecções por SLEV podem não ser reconhecidas ou confundidas com outras causadas por arbovírus como a dengue.

Identificação das espécies de roedores reservatórios de hantavírus no sul e sudeste brasileiro: (Nota Prévia) / Identification of hantavirus rodent reservoirs species in south and southeastern Brazil: (Previous Note)

BACKGROUNS: Hantavirus is a genus belonging to the Bunyaviridae family. Human infection occurs mainly by inhalation of aerosols formed from wild rodent droppings. The objectives of this study were to identify the species of rodent reservoirs of hantavirus that cause the cardiopulmonary syndrome in the southern and southeastern regions of Brazil; to understand the eco-epidemiology of this virus and the wild rodents' systematics. MATERIAL AND METHODS: Rodents were captured using Sherman traps distributed throughout natural environments and around human settlements in localities were hantavirus cardiopulmonary syndrome was detected. After species identification, biometric measures were taken of each animal. Samples of blood, liver, kidney, spleen, heart and lung were preserved in liquid nitrogen and sent to the laboratory. Blood samples were tested for IgG antibodies for hantavirus using an enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Voucher specimens are available at the Instituto Adolfo Lutz collection. RESULTS: A total of 4,069 rodents, belonging to 22 species, were captured. From these rodents, 201 had IgG antibodies for hantavirus. The number of positive specimens per number of captured rodents according to the natural environments studied is the following: a) Mainland: Bolomys lasiurus (130/1187), Oximicterus ruttilans (1/6), Thalpomys lasiotis (0/2), Oligoryzomys stramineus (0/1), Oryzomys nitidus (0/24), Pseudoryzomys simplex (0/14), Calomys tener (22/910), Calomys callosus (2/107); b) Atlantic rainforest: Bolomys sp (1/51), Brucepattersonius soricinus (0/16), Oximicterus quaestor (0/15), Thaptomys nigrita (1/59), Delomys dorsalis (0/1), Delomys sublineatus (0/4) Oligoryzomys delticola (0/5), Oryzomys capito (0/3), Oryzomys ratticeps (0/7), Calomys laucha (0/26); c) Both habitats: Akodon sp (14/910), Oligoryzomys nigripes (28/360), Rattus rattus (0/9), Mus musculus (2/352). Oligoryzomys nigripes was more frequent in the Atlantic rainforest. Bolomys lasiurus showed the highest capture index (44%) and the highest antibody prevalence among mainland species (10.9%). In the Atlantic rainforest, Akodon sp was the most captured species (45,4%) and Oligoryzomys nigripes showed the highest antibody prevalence (7,8%). CONCLUSIONS:Antibody prevalence indicates Bolomys lasiurus as the reservoir of hantavírus in the mainland regions of São Paulo and Minas Gerais and Oligoryzomys nigripes in the Atlantic rainforest of São Paulo, Rio Grande do Sul, Paraná and Santa Catarina. Species belonging to the genus Akodon and Calomys showed lower prevalence, and complementary studies are needed to clarify their role in hantavirus epidemiology.

DELINEAMENTO DO PROBLEMA: Os hantavirus formam um gênero da família Bunyaviridae . A infecção humana ocorre, principalmente, pela inalação de aerossóis formados a partir de excretas de roedores silvestres infectados. Os objetivos deste trabalho foram identificar as espécies de roedores reservatórios de hantavírus causadores de síndrome cardiopulmonar nas regiões Sul e Sudeste do Brasil; e compreender a ecoepidemiologia desses vírus e a sistemática de roedores silvestres. MATERIAL E MÉTODOS: Em locais onde ocorreram casos de síndrome cardiopulmonar por hantavírus, foram realizadas capturas de roedores silvestres com auxílio de armadilhas tipo Sherman, distribuídas nos diversos biomas e ambientes domiciliares, peridomiciliares e silvestres. Após identificação sistemática da espécie, medidas biométricas foram tomadas de cada animal. Amostras de sangue, fígado, rim, baço, coração e pulmão foram conservadas em nitrogênio líquido e levadas para o laboratório. O sangue foi testado pela técnica imunoenzimática (ELISA) para detecção de anticorpos IgG para hantavírus. As carcaças dos roedores foram depositadas na coleção do Instituto Adolfo Lutz. RESULTADOS: Foram capturados 4.069 roedores, de 22 espécies. Desses, 201 roedores apresentaram anticorpos IgG para hantavírus. As espécies e os respectivos números de roedores positivos por capturados, de acordo com os biomas estudados foram: a) cerrado: Bolomys lasiurus (130/1187), Oximicterus ruttilans (1/6), Thalpomys lasiotis (0/2), Oligoryzomys stramineus (0/1), Oryzomys nitidus (0/24), Pseudoryzomys simplex (0/14), Calomys tener (22/910), Calomys callosus (2/107), b) Mata Atlântica: Bolomys sp (1/51), Brucepattersonius soricinus (0/16), Oximicterus quaestor (0/15), Thaptomys nigrita (1/59), Delomys dorsalis (0/1), Delomys sublineatus (0/4) Oligoryzomys delticola (0/5), Oryzomys capito (0/3), Oryzomys ratticeps (0/7), Calomys laucha (0/ 26); c) nos dois biomas: Akodon sp (14/910), Oligoryzomys nigripes (28/360), Rattus rattus (0/9), Mus musculus (2/352). Oligoryzomys nigripes foi consideravelmente mais freqüente na mata atlântica. Bolomys lasiurus apresentou maior índice de captura (44%) e de prevalência de anticorpos entre espécies de cerrado (11%), enquanto na mata atlântica, Akodon sp foi a mais capturada (45%) e Oligoryzomys nigripes apresentou maior soropositividade (8%). CONCLUSÕES: Baseando-se na prevalência de anticorpos, Bolomys lasiurus foi identificado como reservatório de hantavírus nas regiões de cerrado de São Paulo e Minas Gerais e Oligoryzomys nigripes nas regiões de mata atlântica de São Paulo, Rio Grande do Sul, Paraná e Santa Catarina. Espécies do gênero Akodon e Calomys mostraram baixas soroprevalências e requerem novos estudos para esclarecer seu papel na epidemiologia do hantavírus.

Arbovírus Ilheus em aves silvestres (Sporophila caerulescens e Molothrus bonariensis) / Ilheus arbovirus in wild birds (Sporophila caerulescens and Molothrus bonariensis)

Objetivo: Relatar o isolamento do vírus Ilheus no Estado de São Paulo e avaliar o seu impacto para a saúde pública. Métodos: O isolamento de vírus foi realizado em camundongos albinos Swiss, a partir de sangue de aves silvestres, capturadas com redes de espera tipo mist net, armadas no nível do solo, no Parque Ecológico do Tietê, São Paulo. A identificação das cepas isoladas foi feita pelos testes de inibição da hemaglutinação, fixação de complemento e neutralização em camundongos. Amostras de plasma de aves e de mamíferos silvestres foram submetidas à pesquisa sorológica para detecção de anticorpos inibidores de hemaglutinação. Resultados: Foram isoladas duas cepas do vírus Ilheus em sangue de aves das espécies Sporophila caerulescens e Molothrus bonariensis e detectados anticorpos em aves das espécies Columbina talpacoti, Geopelia cuneata, Molothrus bonariensis e Sicalis flaveola, em sagüis das espécies Callithrix jacchus e Callithrix penicillata e no quati Nasua nasua. Conclusões: O isolamento do vírus Ilheus e a detecção de anticorpos específicos em aves residentes, migratórias e de cativeiro, em sagüis e quatis, comprovam a presença desse agente no Parque Ecológico do Tietê. O comportamento migratório de aves silvestres pode determinar a introdução do vírus em outras regiões. Considerando-se a patogenicidade para o homem e a confirmação da circulação desse agente viral em área urbana, freqüentada para atividade de lazer e de educação, o risco de ocorrência de infecção na população humana não pode ser descartado

Isolamento do flavivírus Iguape a partir de mosquitos Anopheles (Kerteszia) cruzii em Juquitiba - Estado de Säo Paulo - Brasil / Isolation of flavivirus Iguape from mosquitoes Anopheles (Kerteszia) cruzii in Juqutiba - Säo Paulo State - Brazil

O flavivírus Iguape foi isolado pela primeira vez em 1979, a partir de camundongo sentinela, exposto em floesta no Município de Iguape, Estado de Säo Paulo, Brasil. Anticorpos inibidores da hemaglutinaçäo, monotípicos para o vírus Iguape, foram detectados em animais domésticos e silvestres na Regiäo do Vale do Ribeira, SP. Anticorpos monotípicos têm sido também detectados em soros humanos, embora näo haja evidência de doença clínica. O estudo foi realizado em maio de 1994, no Município de Juquitiba, SP, em área de floresta. Mosquitos foram capturados com armadilhas luminosas. Após identificaçäo sistemática, lotes de cerca de 30 mosquitos da mesma espécie foram processados para isolamento de vírus, empregando-se camundongos. A identificaçäo foi realizada por testes de Hemaglutinaçäo, Inibiçäo de Hemaglutinaçäo, Fixaçäo de Complemento, Neutralizaçäo em camundongos e sensibilidade ao desoxicolato de Sódio. Uma cepa de vírus (SPAr-158482) foi obtida apartir de mosquitos Anopheles (Kerteszia) cruzii. O agente isolado apresentou significante sensibilidade ao Desoxicolato de Sódio. A sorologia por Inibiçäo de Hemaglutinaçäo, Fixaçäo de Complemento e Neutralizaçäo em camundongos, indicou que a cepa isolada é idêntica ao vírus Iguape. Esses achados sugerem que o An. cruzii pode desenpenhar algum papel no ciclo de transmissäo do vírus Iguape, em ambientes naturais. (AU)

The flavivirus Iguape was isolated for the first time in 1979, from a sentinel mouse exposed in a forested area in Iguape County - SP, Brazil. Monotypic hemagglutination inhibition antibodies for Iguape virus were detected in domestic and sylvan animals, in Ribeira Valley region, S"o Paulo State. Monotypic antibodies have also been detected in human sera, although there is no evidence of clinical disease. The authors report the isolation of a new strain of Iguape virus from naturally infected mosquitoes. The study was conducted in May, 1994 in Juquitiba County ñ S"o Paulo State, in a forested area.Mosquitoes were captured by light traps . After systematics identification, pools of mosquitoes were processed for virus isolation in suckling mice. An isolate (SPAr-158482) was obtained from Anopheles (Kerteszia) cruzii. Tests of Hemagglutination, Hemagglutination Inhibition, Complement Fixation, Neutralization in suckling mice and sensitivity to Sodium Deoxycholate were employed for identification. (AU)

Jungle yellow fever: clinical and laboratorial studies emphasizing viremia on a human case

Os autores estudaram um caso humano de febre amarela silvestre, sob os aspectos clinico, laboratorial e epidemiologico. O paciente apresentava febre (39ºC), calafrios, sudorese, cefaleia, dor lombar, mialgia, dor abdominal em epigastrico, nauseas, vomitos, diarreia e prostracao. Realatava permanencia em areas onde foram constatados casos de febre amarela silvestre e nao havia historico de vacinacao anterior...

Arbovírus causadores de epidemias no Brasil: infecçäo experimental de vetores suspeitos, comprovados ou potenciais / Arbovirus producing epidemies in Brazil: experimental infection of suspicious vectors, confirmed or potentials

Realiza uma apreciaçäo de avaliaçöes de competência vetora de mosquitos, na transmissäo horizontal dos vírus Mayaro, Oropouche, Rocio, Dengue e Febre Amarela, abordando aspectos relativos aos impactos desses vírus na saúde humana, bem como às suas limitaçöes. Os atributos da competência vetora apresetam variaçöes dependentes do mosquito, do vírus, do método e técnicas empregados nos experimentos. Pode-se deparar, freqüentemente, com variáveis näo controláveis, sendo uma das mais importantes, o nível de viremia de animais utilizados como fonte de infecçäo oral dos mosquitos. Apresenta conceitos específicos desses estudos, tais como: taxa de infecçäo, taxa de transmissäo, período de incubaçäo extrínseca e limiar de infecçäo. Conclui que säo numerosas as limitaçöes desses estudos experimentais, sendo portanto necessários estudos ecológicos que, em conjunto com dados de laboratório, possibilitem a interpretaçäo real do papel vetor de mosquitos